在动物实验中,药物通常会以溶液 (Solution) 或混悬液 (Suspension) 的形式给药。我们需选择合适的溶剂,可以辅助超声加热措施,得到澄清的溶液或适合给药的混悬液。
■ 人见人爱的生理盐水/PBS
对于水溶性很好的产品,用生理盐水 (Saline) 或者 PBS 现配现用是最合适的了,此方案适合多种给药方式,且不需考虑溶剂的毒性作用。
■ 忍辱负重的有机溶剂们
1、DMSO
实际上,我们实验中会碰到很多水不溶的产品,这时候 DMSO 该登场了。我们知道,一般细胞实验中 DMSO 含量终浓度尽量在 0.1% 以下,而在动物实验中,对于正常鼠,建议 DMSO 的终浓度不大于 10%;对于裸鼠或体弱鼠,建议 DMSO 的终浓度尽量不要超过 2% 。
通常,DMSO 配制的母液如果直接用生理盐或 PBS 稀释成工作液,有可能出现析出的情况,这时就需要助溶剂的鼎力相助啦。例如,我们经常推荐的方案:10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween-80 + 45% Saline,很多客户有疑惑,这个方案中溶剂这么多,对鼠有毒性吗?是否适合灌胃或者腹腔等给药方式呢?首先,无论使用什么溶剂,实验都需要做好溶剂对照组,以排除溶剂的影响;其次,这个方案是比较普遍的适用方案,对于正常鼠按照比例稀释是基本不会有问题的,可用于腹腔、灌胃等方式。
这里有疑问
实验人甲:我不想要这么高的 DMSO。
实验人乙:我没有 Tween-80,Tween-20 可以替代吗?
实验人丙:PEG300 可以用 PEG400 替代吗,比例还可以更高吗?
萌 Cece:只要溶解度允许,可以降低 DMSO 含量,建议取少量尝试,因为水溶性如果很差的话,可能会有析出。尽量使用 Tween-80 , 动物耐受性更好些;PEG300 的比例可上调, 90% PEG300 用于裸鼠腹腔给药也是有报道的;另外,PEG400 可以替代,也有用 PEG600 的,但不是很建议,因为熔点接近常温。整体来说,PEG300 不管从耐受性,还是粘稠度上来说,都是最佳选择。
2、乙醇、DMF
乙醇也是较常用的一种溶剂,在动物中的使用方法跟 DMSO 类似,但是要注意,乙醇易挥发,所以在存储过程中,注意密封。
作为 DMSO 和乙醇的好兄弟,DMF,是一种挥发速度低的极性溶剂,