Rockland丨Rockland抗寡核苷酸抗体开发流程

每个寡核苷酸抗体生产项目通常包括抗原制备、抗体开发、纯化和表征，整个过程需要 8 个月。

 

第 1 阶段：抗原制备

了解目标核酸抗原的生化特性，并且在使用各种化学物质方面经验丰富，包括：

常规寡核苷酸（12-15 个碱基）

DNA-RNA杂交体

具有硫代磷酸酯 (PS) 和二硫代磷酸酯 (PdiS) 修饰骨架的修饰寡核苷酸

单链寡核苷酸混合物（鸡尾酒）

单链 RNA (ssRNA)

双链 RNA (dsRNA)

核苷酸

核苷

由于核酸本身是众所周知的弱免疫原并且难以在免疫测定中用作分析物，因此Rockland开发并优化了许多不同的缀合方法，以增强靶核酸的免疫原性。

艾美捷Rockland的缀合方法导致寡核苷酸高效呈递给宿主免疫系统，从而产生特异性识别骨架特异性核酸（例如硫代磷酸酯）和/或组合物（即RNA-DNA杂合体）的抗体。

除了作为免疫原外，缀合的靶核酸还是筛选免疫测定和克隆选择的高效试剂。

第 2 阶段：抗寡核苷酸抗体开发

对于抗寡核苷酸多克隆抗体的产生，Rockland推荐宿主、免疫方案和测试策略。Rockland还纯化抗体，通过交叉吸附增强特异性，并使用Rockland在项目开始时建立的预定标准验证性能。

对于传统的单克隆和重组抗体生成，Rockland推荐产生具有所需性能特征（如灵敏度、特异性、产量和亲和力）的抗体试剂的克隆细胞系。

 

第3阶段：抗体生产和纯化

Rockland使用多种方法生产和纯化抗寡核苷酸抗体，具体取决于是生产多克隆抗体、常规单克隆抗体还是重组抗体。

Rockland 允许不同的生产批量，从小规模试验批次到使用滚瓶培养或大型动物抗血清池的大规模生产批次。

多克隆和常规单克隆的纯化选项：

蛋白 A 纯化

蛋白 G 纯化

蛋白 A/G 纯化

IgG纯化

IgY纯化

低内毒素纯化

第 4 阶段：抗体表征和验证

Rockland的抗寡核苷酸抗体的特异性和敏感性可以使用多种不同的免疫测定来表征，包括 ELISA、Western Blot 和 IHC。在生产适合用途的抗体时，会使用预期的检测方法来验证性能。

 

图：用于 ELISA 的抗寡核苷酸抗体的示例表征。将来自用寡核苷酸混合物免疫的兔的抗血清以递增的量添加到包被有载体结合抗原的ELISA板上。来自兔子的两次预出血都证实了宿主之前没有接触过抗原。