Kamiya丨Kamiya艾美捷小鼠高敏CRP ELISA说明书

Kamiya艾美捷小鼠高敏CRP ELISA预期用途：

小鼠高敏CRP ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫分析（ELISA）定量测定小鼠生物样品中的C-反应蛋白（CRP）。仅供研究使用。

引言

急性期蛋白质是血浆蛋白质，其在感染，炎症或创伤后浓度增加。Tillet和Frances于1930年在人类中发现了第一个被识别的急性期蛋白。这种CRP就是这样命名是因为它能够影响肺炎链球菌的体细胞C-多糖的沉淀。CRP是一种质量为110000至140000道尔顿的α-球蛋白，由五个相同的亚基组成，它们非共价组装成环状五聚体。它在肝脏中合成，在人体中通常以痕迹的形式存在血清成分低于0.3 mg/dL。急性组织损伤后血清水平迅速升高一旦刺激被消除，也会非常迅速地下降。有人提出CRP有助于补体激活，影响吞噬细胞功能并增强细胞介导的细胞毒性。过去几年的调查表明血浆或血清中CRP的定量可以为检测，预后和预后提供有价值的信息不仅在人类中，而且在伴侣动物和农场中监测疾病。

Kamiya艾美捷小鼠高敏CRP ELISA原理：

双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在该测定中，CRP存在于样品与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗CRP抗体反应。之后通过洗涤去除未结合的样品蛋白质，与辣根过氧化物酶（HRP）缀合的抗CRP抗体是补充。该HRP缀合的抗体与先前结合的CRP形成复合物。在另一个洗涤步骤之后，通过添加显色底物3,3'，5,5'来测定与免疫吸附剂结合的酶-四甲基联苯胺（TMB）。结合酶的数量与样品中CRP的浓度成正比测试；因此，450nm处的吸光度是测试样品中CRP浓度的量度。数量测试样品中的CRP可以从校准器构建的校准曲线内插，并进行校正样品稀释。

Kamiya艾美捷小鼠高敏CRP ELISA组件：

1.稀释剂浓缩物

一瓶含有50毫升5X浓缩稀释剂运行缓冲液。

2.洗涤液浓缩物

一瓶装有50毫升20X浓缩洗涤液。

3.酶-抗体缀合物浓缩物

一小瓶含有150μL与HRP缀合的100X浓缩亲和纯化的抗小鼠CRP抗体

稳定缓冲器。

4.TMB底物溶液

一瓶含有12mL TMB和过氧化氢的柠檬酸缓冲液，pH3.3。

5.停止解决方案

一瓶含有12毫升0.3M硫酸。

警告：避免接触皮肤。

6.微量滴定板

在孔保持器框架中有12个可拆卸的8孔条。孔用亲和纯化的抗小鼠CRP包被。

7.鼠标CRP校准器

一个小瓶含有冻干的小鼠CRP校准品。

8.积极控制

一小瓶含有50μL含0.1%叠氮化钠的血清。请参阅浓度控制证书。