蛋白酶K是一种从白色念珠菌分离出来的强力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的关键试剂。该酶在较广的pH范围(4〜12.5)内及高温 (50〜70°C)均有活性,用于质粒或基因组 DNA、RNA的分离。在DNA提取中,主要作用是酶解与核酸结合的组蛋白,使 DNA游离在溶液中,随后用不同方法进行抽提,除去杂质,收集DNA。EDTA等螯合剂或SDS等去垢剂均不能使之失活。蛋白酶K贮存液一般为10mg/ml或20mg/ml。 贮存于-20°C。蛋白酶K溶液为无色透明,如出现沉淀就不能再使用。
艾美捷重组蛋白酶K是一种不含动物源性物质的(animal origin-free, AOF)的蛋白酶K,通过毕赤酵母(Pichia pastoris)发酵并纯化获得。
尽管钙离子不影响酶的活性,但当浓度为1-5μmol时,它们确实有助于酶的稳定性。蛋白酶K的一个有趣的特征是,它在十二烷基硫酸钠(SDS)或尿素存在下保持活性。(0.5-1%SDS和1-4M尿素)。将反应温度从37℃提高到50℃-60℃可以将活性提高几倍。蛋白酶K的一个特殊特征是其消化天然蛋白质的能力,从而使酶如DNase和RNase失活,而无需借助变性过程。
艾美捷重组蛋白酶K,无动物源/AF稳定性/储存:冻干粉末在2-8°C下稳定一年。50mM Tris-HCl,pH 8.0和1mM CaCl2的溶液在2-8°C下稳定数月。储存于2-8°C。
艾美捷重组蛋白酶K,无动物源/AF单位定义:在37°C,pH 7.5,使用尿素变性血红蛋白作为底物,One Unit释放1微摩尔Folin阳性氨基酸(以酪氨酸计)。
相关研究:
Proteinase K
Source: Tritirachium album limber
A lyophilized powder. Purified to remove DNase and RNase.
Store at 2-8°C.
Proteinase K, Solution
Source: Tritirachium album limber
A concentrated, ready to use liquid formulation. Proteinase K prepared at 20mg/ml in 10mM Tris-HCl, 1mM calcium acetate, pH 7.5 containing 50% glycerol. DNase- and RNase- free.
Store at -20°C.
Proteinase K, (Recombinant) Solution
Source: Tritirachium album limber
A concentrated, ready to use liquid formulation. Recombinant Proteinase K prepared at 20mg/ml in 10mM Tris-HCl, 1mM calcium acetate, pH 7.5 containing 50% glycerol. DNase- and RNase- free. Store at -20°C
Store at -20°C.