艾美捷Cas9核酸酶参数说明和应用

CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。CRISPR/Cas9系统通过将入侵噬菌体和质粒DNA的片段整合到CRISPR序列中，并利用相应的CRISPR RNAs （crRNAs）来指导Cas9蛋白对同源序列的降解，从而提供免疫性。人工改造过的Cas9/sgRNA系统通过sgRNA（short guide RNA）引导Cas9蛋白识别并剪切带有sgRNA靶点的双链DNA，可用于基因敲除和较精确编辑DNA等操作。

艾美捷Cas9核酸酶：在大肠杆菌中表达的重组化脓链球菌Cas9（wt）蛋白。

 

艾美捷Cas9核酸酶化学性质：

形式：液体

制备方法：E。大肠杆菌表达系统

纯度：≥ SDS-PAGE检测95%

活性：20 nM CRISPR/Cas9-C-NLS核酸酶在37℃下孵育1小时，通过琼脂糖凝胶电泳测定，底物DNA的消化率为90%。

推荐用法：CRISPR基因组编辑

最佳工作稀释度应由最终用户确定。

储存缓冲液：10 mM Tris、300 mM NaCl、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、50%甘油PH 7.4

储存说明：储存于-20°C。

等分试样以避免反复冷冻和解冻。

艾美捷Cas9核酸酶应用：

1、CRISPR Genomic

2、EditingElectrophoresis

图：用Cas9核酸酶进行电泳DNA切割试验。输入DNA是EcoRV线性化的pUC57质粒DNA。（1） DNA+gRNA（2）DNA+gRNA+10 ng Cas9（3）DNA+gRNA+25 ng Cas9