Cyanine5(CY5)和CY5-NHS ester都是荧光染料,它们可以与生物分子中的氨基酸残基发生共价结合。这种共价结合是选择性的,通常是特定氨基酸残基的赖氨酸(lysine)或其他氨基酸。
选择性的实现取决于以下因素:
pH条件:共价结合的选择性通常受到反应条件的影响,特别是溶液的pH值。CY5-NHS ester的共价结合反应通常在碱性条件下进行,因此只有那些在碱性条件下较活跃的氨基酸残基(如赖氨酸)才会被选择性地标记。
特定氨基酸的可用性:在生物分子中,不同的氨基酸残基具有不同的反应性。CY5-NHS ester主要与赖氨酸(lysine)反应,因此选择性标记取决于赖氨酸残基的可用性和数量。
反应时间和温度:在标记反应中的反应时间和温度也会影响选择性。较长的反应时间和较高的温度可能导致非特异性结合,因此需要进行优化以获得最佳选择性。
控制反应条件:为了实现更高的选择性,可以采取措施来控制反应条件,例如在反应前对生物分子进行预处理,以减少非特异性结合位点的数量。
总的来说,CY5-NHS ester的选择性标记取决于实验条件的优化以及目标生物分子中赖氨酸残基的可用性。通过仔细控制反应条件和优化实验设计,可以实现更高程度的选择性,以确保只标记所需的氨基酸残基。此外,在实验过程中,可能需要使用控制试验来验证标记的选择性。
Sulfo-CY3 maleimide
Sulfo-CY7 NHS ester
FITC-dextran
HSA-FITC
CY7 NHS ester
CY5 NHS ester
CY3 COOH
FITC-PEG-MAL
Sulfo-CY3 amine
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