Enzo丨Enzo 链霉亲和素阻滞剂/稀释剂方案

Enzo 链霉亲和素阻滞剂/稀释剂：即用封闭缓冲液和稀释剂，用于SAVIEW®PLUS检测试剂。

 

艾美捷Enzo 链霉亲和素阻断剂/稀释剂可用于防止IHC和ISH的生物素缀合检测系统中的非特异性结合。它也可用作生物素化抗体的稀释剂。该试剂用于福尔马林固定石蜡包埋组织切片和冷冻切片的定性免疫组织化学和原位杂交。阻断剂/稀释剂也可用于血液涂片、细胞测量仪和细胞制剂。

艾美捷Enzo  链霉亲和素阻滞剂/稀释剂化学性质：

应用：IHC

原位杂交

发货：蓝冰未冷冻

长期储存：+4°C

技术信息说明：链霉亲和素阻断剂/稀释剂是一种独特的阻断溶液，用于防止非特异性背景染色。除免疫组织化学外，链霉亲和素阻断剂/稀释剂也可用于ISH。

链霉亲和素阻滞剂/稀释剂也可用作SAVIEW®PLUS HRP试剂（ENZ-ACC102）和SAVIEW®PLUS AP试剂（ENZ-ACC111）的稀释剂。它也可以作为生物素化抗体的稀释剂。

艾美捷Enzo 链霉亲和素阻滞剂/稀释剂方案：

将福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织切片置于载玻片夹中。

在55-60°C的干燥炉中加热20分钟。

用二甲苯（或二甲苯替代物）脱蜡10分钟。

然后用100%乙醇浸泡6分钟。

在每个步骤中将载玻片再水化1分钟：90%、70%、50%乙醇，最后在蒸馏水或去离子水中。

用抗原回收试剂（柠檬酸盐，pH6）或抗原回收剂（Tris-EDTA，pH9）在99°C下回收抗原20分钟。

用PBST洗涤5分钟。

擦拭载玻片切片周围的多余液体，并用PAP笔环绕组织切片。

干燥幻灯片10秒

将组织培养至过氧化物酶块5分钟。

用PBST清洗2分钟。

研究人员需要优化生物素化一级抗体的浓度和培养时间（建议时间：20至30分钟）

用PBST清洗5分钟。

如果使用未标记的小鼠一级抗体，切片必须与生物素化的抗小鼠抗体孵育，如果使用未标签的兔一级抗体则使用生物素化兔抗小鼠接头（在阻断剂/稀释剂中稀释）15分钟。

用PBST清洗5分钟。

用足够的Streptavidin阻断剂/稀释剂孵育切片，覆盖组织切片10分钟，以阻断SAVIEW®PLUS HRP的非特异性结合（用于色原检测）

使用SAVIEW®PLUS检测试剂和HIGHDEF®显色剂可视化抗原。

艾美捷Enzo 链霉亲和素阻滞剂/稀释剂ISH（原位杂交）推荐方案：

将福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织切片置于载玻片夹中。

在55-60°C的干燥炉中加热20分钟。

用二甲苯（或二甲苯替代物）脱蜡10分钟。

然后用100%乙醇浸泡6分钟。

在每个步骤中将载玻片再水化1分钟：90%、70%、50%乙醇，最后在蒸馏水或去离子水中。

擦拭载玻片切片周围的多余液体，并用PAP笔环绕组织切片。

干燥幻灯片10秒。

将组织暴露于过氧化物酶阻断剂5分钟。

用洗涤缓冲液洗涤2分钟。

将载玻片放在37°C的热板上。

添加最佳浓度的蛋白酶K（建议：25-80μg/mL，随组织类型和厚度变化），并在37°C下孵育10分钟。

用PBST清洗5分钟。

研究人员需要优化生物素化RNA或DNA探针的浓度和孵育时间（建议：在95°C下变性10分钟，杂交至少120分钟，DNA探针通常在37°C下，RNA探针为42°C）。

将变性探针添加到切片中。

带盖玻片的盖子

杂交后用40%甲酰胺+6X SSPE缓冲液严格清洗10分钟。

用PBST清洗5分钟。

用足够的Streptavidin阻断剂/稀释剂孵育切片，覆盖组织切片10分钟，以阻断SAVIEW®PLUS检测试剂的非特异性结合。

使用SAVIEW®PLUS检测试剂和HIGHDEF®显色剂可视化抗原。

监管状态：RUO-仅供研究使用