Worthington公司天冬酰胺酶丨L-天冬酰胺浓度测定应用

Worthington公司有关天冬酰胺酶的历史：

1904 年，Lang 成为个检测牛肉组织中天冬酰胺酶活性的人。Fürth 和 Friedmann 在 1910 年证实了这些结果。Fürth 和 Friedmann 认为在所有动物组织中发现天冬酰胺酶的活性水平相同，后来被 Clementi (Clementi 1922) 驳斥，他的实验得出的结论是该酶在几乎所有食草动物组织中都有活性，仅在杂食动物的肝脏中存在，而在肉食动物、两栖动物和爬行动物的器官中不存在（Michalska and Jaskolski 2006）。

1953 年，Kidd 报道了豚鼠血清的抗肿瘤特性，后来将其归因于天冬酰胺酶的活性（Broome 1961）。1963 年，Mashburn 和 Wriston 发现大肠杆菌酶具有抗肿瘤活性。在几个实验室进行的工作导致了临床试验，使大肠杆菌天冬酰胺酶 II 成为个临床使用的抗白血病 L-天冬酰胺酶（Roberts等人1966、Old等人1967、Boyse等人1967、Hill等人1967 、Clarkson等人1970 年和 Oettgen等人1970 年）。很快就发现除了分泌的 EcAII，大肠杆菌（和其他细菌）也产生胞浆天冬酰胺酶，即天冬酰胺酶 I (EcAI)，它对 L-天冬酰胺的亲和力较低，对癌症无效（Willis 和 Woolfolk 1974）。

1974 年进行了初步确定一级结构的努力，1990 年确定了序列（Maita等人1974，Maita 和 Matsuda 1980，以及 Bonthron 1990）。在 Epp等人的晶体学研究之后。1971 年，Ammon等人在 1988 年发表了 EcAII 晶体结构的部分模型。虽然不完全准确，但该结构被 Swain等人用作垫脚石。他在 1993 年阐明了真实结构。已经确定了来自各种生物体的 L-天冬酰胺酶的许多晶体结构（Lubkowski等人， 2003 年）。

目前对 L-天冬酰胺酶的研究继续关注其肿瘤学重要性，以及 EcAII 靶向的特定转录因子（Suto等人， 2010 年）。目前还在研究各种来源的 L-天冬酰胺酶的结构-功能关系（Labrou 和 Papageorgiou 2010 和 Bansal等人2010）。

 

Worthington公司天冬酰胺酶的特异性：

与 EcAI 相比，EcAII 表现出广泛的 pH 活性分布和更高的底物亲和力。该反应包括两个步骤。步，亲核苏氨酸攻击酰胺底物的羰基，生成酰基酶中间体。释放出一个氨分子。第二步，水攻击酰基酶中间体以产生 L-天冬氨酸 (Michalska and Jaskolski 2006)。

 

  

Worthington天冬酰胺酶分子特征：

编码 L-天冬酰胺酶 II 的基因 ans B 的启动子由 cAMP 受体蛋白 (CRP) 和 FNR 蛋白共同激活 (Scott  et al.  1995)。CRP 响应于碳源而被激活，而 FNR 蛋白（即 fnr 基因产物）响应于厌氧而被激活。FNR 位点位于主要起始位点上游 41.5 bp，FNR 位点上游 28 bp 是 CRP 调节位点（Jennings 和 Beacham 1993）。

Worthington天冬酰胺酶的应用：

治疗急性淋巴细胞白血病 (Zhang et al. 2004)

L-天冬酰胺浓度测定 (Gentili et al. 1994)

Worthington公司天冬酰胺酶参考文献（部分）：

Cammack, K., Marlborough, D., and Miller, D.: Physical Properties and Subunit Structure of L-Asparaginase Isolated from erwinia carotovora , Biochem J 126, 361, 1972

Campbell, H., Mashburn, L., Boyse, E., and Old, L.: Two L-Asparaginases from E. coli B: Their Separation, Purification and Antitumor Activity , Biochemistry 6, 721, 1967

Chakrabarty, A., and Friedman, H.: L-Asparaginase-Induced Immunosuppression: Effects on Antibody-Forming Cells and Serum Titers , Science 167, 869, 1970