Nanoprobes纳米探针丨Nanogold偶联物的特点和应用

艾美捷 Nanoprobes Nanogold®-抗体和链霉亲和素偶联物：

1.4 nm Nanogold® 二抗和链霉亲和素偶联物

用于 EM、LM、印迹和诊断。

 

 

Nanoprobes Nanogold偶联物的特点：

1.最小的市售金免疫探针。

2.穿透并到达其他探针无法触及的抗原：经证实可穿透高达 40 µm 的细胞和组织切片。

3.J其均匀的 1.4 nm 直径金标签。

4.提供 Fab'、IgG 和链霉亲和素偶联物。

5.接近 1 个 Nanogold® 粒子到 1 个 Fab'（或 IgG）。

6.低非特异性亲和力产生最小的背景。

7.银增强的超灵敏性：免疫印迹上抗原检测量为 0.1 pg。

8.金与远离抗原结合区域的抗体共价连接。

9.高稳定性和长保质期：结合物在储存一年后反应性不变。

10.在广泛的 pH 值和离子强度范围内稳定。

艾美捷 Nanoprobes Nanogold偶联物的应用：

1.新的用于 EM 的蛋白质融合标签的金标记

2.超薄冷冻切片的 EM，

参见：Takizawa, T. 和 Robinson, JM；J. Histochem Cytochem., 42 , 1615-1623 (1994))。[其他参考]。

3.预嵌入电子显微镜。[参考资料]

4.嵌入后电子显微镜（对于嵌入前和嵌入后的方法，

参见：Nusser, Z. 等人：J. Neuroscience, 15 , 2948-2960 (1995)）。[其他参考]

5.相关电子和光/共焦显微术（参见：Sun, XJ, et al.: J. Histochem. Cytochem., 43 , 329-35 (1995)）。

6.原位杂交检测。[参考资料]

7.扫描电子显微镜（参见：Hermann, R. 等人：Histochem. Cell Biol., 106 , 31-39 (1996)）。

案例1：原位杂交应用：

Nanogold® 探针的小尺寸及其对核抗原的访问能力，加上银增强获得的高灵敏度，使其成为超灵敏的特定 DNA 序列原位杂交检测的专业试剂，无论有无原位 PCR。使用生物素化酪胺（催化报告分子沉积或 CARD，也称为酪胺信号放大或 TSA）放大目标信号获得了惊人的结果：使用 Nanogold®-链霉亲和素和银增强检测产品，即使在细胞中也能产生清晰的信号仅具有一个或两个拷贝的靶基因，在 RNA 检测中可以看到类似的灵敏度（参见：Zehbe, I. 等人：是。J. Pathol., 150 , 1553-1561 (1997))。

优点：

比 NBT-BCIP 碱性磷酸酶或过氧化物酶与标记扩增结合用于单基因拷贝分辨率更敏感。

大多数情况下不需要更冗长的 PCR 程序：避免因错误引发和扩增子扩散而导致的假阳性。

用标准明场显微镜很容易看到黑色。不需要昂贵的荧光光学元件，也没有自发荧光或漂白问题。

黑色信号颜色与全强度标准细胞和核染色剂（H & E、核固红、甲基绿）兼容。

也可用于 EM 研究的高空间分辨率信号。

案例2：电子显微镜：

Nanogold® 偶联物很容易扩散到几十微米的组织、透化细胞和细胞核中，而大多数胶体金探针很难在这些地方扩散。染色更具化学计量性，背景较低。尽管 1.4 nm Nanogold® 颗粒在 50-120 kX 放大倍率下直接可见，即使在 80 nm 切片中（在其他未染色的样品中），在使用银显影剂（LI Silver 或 HQ）进行短暂（1-5 分钟）增强后更容易观察到银）。即使用醋酸铀、锇或柠檬酸铅染色，在较低放大倍率下也很容易看到产生的 2 至 100 nm 银颗粒（大小取决于显影时间）。

案例3：光和共聚焦显微镜：

Nanogold® 探针对透化细胞和细胞核具有出色的穿透力，与免疫荧光探针相似，远优于胶体金探针。Nanogold®-Fab' 探针比免疫荧光 IgG 标记小。Nanogold® 探针不会发生聚集，而且由于 Nanogold® 与共价生物分子共价连接，因此它们非常稳定。随后短暂（5-15 分钟）银增强（LI Silver）即使在普通明场光学显微镜（不需要紫外光学）中也能发出可见信号，其灵敏度通常优于荧光。由于相同的 Nanogold® 探针也可用于 EM，因此可以在光学显微镜或共聚焦显微镜下进行初步染色，同时可以在超微结构 EM 水平上检查平行样品。这种灵活性不适用于荧光探针。Nanogold® 现在可与链霉亲和素和抗生物素 Fab' 结合用于核酸检测。