MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)是一种非常经典的细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒,被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。
艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒测定原理：
Cell Biolabs艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒含有足够的试剂用于评估在96孔板中进行960次测定或在24孔板中进行192次测定。细胞可以被镀，然后用影响增殖的化合物或药剂。然后用增殖试剂检测细胞，在活细胞中由黄色四唑MTT转化为紫色福尔马赞形式细胞还原酶。细胞增殖的增加伴随着信号的增加，虽然细胞增殖（和信号）的减少可以表明化合物的毒性作用或次优的培养条件。
该测定原理是基本的，可应用于大多数真核生物细胞系，包括贴壁和非贴壁细胞以及某些组织。这种细胞增殖试剂可用于检测细菌，酵母，真菌，原生动物以及培养的哺乳动物中的增殖和鱼细胞。
艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒相关参数：
全称：CytoSelect MTT细胞增殖分析试剂盒
英文：CytoSelect MTT Cell Proliferation Assay
编号：CBA-252
规格：960assays
存储：MTT细胞增殖测定试剂是一种透明的黄色即用溶液储存于-20°C，避光。在室温下储存洗涤剂溶液。如果沉淀或在洗涤剂溶液中观察到浑浊，将溶液加热至37°C 10–20分钟使用前搅拌以溶解沉淀物。
套件组件
1.MTT细胞增殖测定试剂（部件号125201）：一瓶10mL MTT试剂。
2.洗涤剂溶液（部件号125202）：一瓶100毫升洗涤剂溶液
艾美捷MTT细胞增殖检测试剂盒测定方案：
1.制备含有0.1-1.0 x 106的细胞悬液培养基中的细胞/ml。
2.将每孔100μL加入96孔细胞培养板或每孔500μL加入24孔细胞培养物中有或没有待测化合物的板。细胞在37°C和5%培养24-96小时加湿培养箱中的二氧化碳。
3.加入10μlCytoSelect™ MTT细胞增殖测定试剂，如果使用96-孔板，或24孔板的每个孔50µL。
4.在37°C和5%CO2下孵育平板3-4小时，直至可见紫色沉淀（细胞在光学显微镜下可以更精确地观察到沉淀物）
5.在96孔板的每孔中加入100μL去污剂溶液，或在24孔板的每孔中加入500μL去污剂溶液盘子。
6.在室温下孵育2小时至避光过夜。
注意：在井中与洗涤剂溶液长时间孵育可能导致沉淀或浑浊可以增加背景。如果观察到沉淀，将板在37℃加热10-20分钟并搅拌溶解沉淀物。
7.使用540-570nm作为主波长读取吸光度。
MTT细胞增殖检测试剂盒部分引用文献：
1. Housein, Z. et al. (2021). In vitro anticancer activity of hydrogen sulfide and nitric oxide alongside nickel nanoparticle and novel mutations in their genes in CRC patients. Sci Rep. 11(1):2536. doi:10.1038/s41598-021-82244-x.
2. Yoshiya, S. et al. (2020). Impact of Capicua on Pancreatic Cancer Progression. Ann Surg Oncol. doi: 10.1245/s10434-020-09339-z.
3. Zhou, K.I. et al. (2019). Regulation of Co-transcriptional Pre-mRNA Splicing by m6A through the
Low-Complexity Protein hnRNPG. Mol Cell. pii: S1097-2765(19)30535-0. doi:10.1016/j.molcel.2019.07.005.