癌症发展和生长的一个共同特征是转化细胞存活的能力在“独立于锚固”或“球体”的生长条件下。这种对失巢凋亡的抵抗力一直存在显示参与细胞稳态,癌症生长和转移的丧失。抑制ECM上的细胞粘附,扩散和生长是细胞愈合过程的障碍,因此使其成为可能的治疗目标。预防失巢凋亡并增强细胞粘附和扩散是细胞移植技术发展的主要目标,包括治疗用途祖细胞。旨在控制失巢凋亡抗性分子机制的进一步研究将有助于确定治疗许多人类恶性肿瘤的有效疗法。
粘附至髓外基质对于许多粘附细胞的存活和繁殖至关重要。因失去对ECM的粘附而导致的凋亡被称为anoikis。Anoikis参与组织更新和细胞稳态的生理过程。细胞失巢凋亡检测试剂盒可让用户使用预涂板定量和监测细胞中的Anoikis。可以在显微镜下观察活细胞,并通过MTT(比色法)或Calcein AM(荧光法)在酶标仪上进行定量。试剂盒中均包含两种试剂。用红色EthD-1试剂(也包括在内)检测死细胞。
艾美捷细细胞失巢凋亡检测试剂盒提供比色和荧光检测格式测量锚定非依赖性生长并监测失巢凋亡推动的细胞死亡。该套件包含用于在聚Hema涂覆的24孔板中测定24个样品的足够试剂。活细胞是用MTT或钙黄绿素AM检测。用乙锭同型二聚体(EthD-1)检测细胞死亡。
套件组件
1.抗锚固板(部件号108001):一块24孔聚Hema涂层板。
2.Calcein AM(500X)(部件号108002):一个小瓶–50μL的DMSO溶液。
3.乙锭同型二聚体(EthD-1)(500X)(部件号108003):一个小瓶–50μL。
4.洗涤剂溶液(部件号108004):一瓶-25.0毫升。
5.MTT溶液(部件号113502):三个管-每个1.0mL。
艾美捷细胞失巢凋亡检测试剂盒测定原理:
细胞在聚Hema包被的平板或对照平板中培养。细胞活力由MTT或钙黄绿素AM。通过乙锭同型二聚体(EthD-1)测量失巢凋亡推动的细胞死亡。EthD-1是测量死细胞的优秀标记。EthD-1是一种只能穿透的红色荧光染料受损的细胞膜。EthD-1在结合ssDNA后会发出40倍的荧光,
dsDNA,RNA,寡核苷酸和三链体DNA。背景荧光水平非常低因为染料在与细胞相互作用之前实际上是非荧光的。
艾美捷细胞失巢凋亡检测试剂盒相关研究:
1.CBA-081:CytoSelect™ 96孔失巢凋亡测定
2.CBA-230:细胞衰老检测试剂盒(SA-β-Gal染色)
3.CBA-231:96孔细胞衰老测定(SAβ-Gal活性)
4.CBA-232:定量细胞衰老测定(SAβ-Gal)
5.CBA-240:CytoSelect™ 细胞活力和细胞毒性测定