之前分析了艾美捷worthington细胞分离优化技术的一般准则，那么接下来一起看看优化技术之优化策略吧~
艾美捷worthington优化技术：优化策略
查看Worthington 组织解离指南的参考文献，了解特定组织和感兴趣的细胞类型，然后将此信息应用于组织解离的实际应用。
基本优化策略的示例如下：
根据引用的酶、工作浓度和使用的缓冲液或培养基系统，设置类似于表中列出的最接近的可用参考的建议初步解离条件。
如果大多数最相似的参考程序引用了一种以上的酶，则在添加辅助酶之前优化主酶的浓度（相对浓度最高的酶）。例如，如果两个最相似的参考文献引用胶原酶 0.1% 和 DNase 0.01%，胶原酶 0.075% 和透明质酸酶 0.025%，则在评估透明质酸酶或脱氧核糖核酸酶的效果之前，凭经验优化胶原酶浓度。
在优化主要酶的浓度和孵育条件后，评估任何次要酶。
最初将主要酶的浓度相对于参考程序改变约 50%。上述胶原酶浓度为 0.1% 和 0.075% 的例子表明酶浓度在 0.025% 和 0.15% 之间的评估。浓度增量应均匀分布以覆盖整个范围。因此，将指示 0.025%、0.05%、0.075%、0.10%、0.125% 和 0.15% 的增量浓度。为了简化初始筛选，可以选择中间范围，在评估产量和活力结果后，可以决定是否需要进一步研究。在这种情况下，评估的初始胶原酶浓度可以是 0.05%、0.075%、0.10% 和 0.125%。
从历史上看，大多数组织解离和细胞分离方案都引用了以每单位体积重量 (w/v) 表示的酶浓度。然而，最近，一些研究人员开始以活性为基础使用酶，即每毫升单位 (u/ml)。使用任何一种方法，但要考虑每种方法的优缺点：
a) 传统的每单位体积重量法很可能是由于使用了较粗的、部分纯化的酶混合物，并且与可能存在的任何特定或污染活性无关地使用。对于这些粗制品中的一些，批次间的差异可能很大，导致添加的酶活性量的重量差异高达两倍。
b) 通过活性添加可能导致添加到解离的重量可能存在两倍的差异；但是，根据每批的主要活性对使用的效力进行标准化。
这两种方法都忽略了相对的污染物活动水平。在建立基本方法后，考虑对不同批次的酶进行预取样以评估这些因素并选择对特定应用的关键参数影响最小的大量酶。
艾美捷worthington重要提示：为了准确评估特定程序的性能，应对细胞产量和活力进行定量和比较。在优化基本解离和分离条件后，还应评估代谢功能或受体结合能力等特定应用参数。基于这些结果，可以判断该方法适合使用或重新优化以更高地保留天然细胞特征。