药物研发检测记录模板--氰化物检查

样品名称

样品规格

样品来源

样品批号

检验日期

检验项目

氰化物检查

检验目的

标准依据

仪器名称

天平               型号               编号                   

紫外分光光度仪     型号               编号                   

试剂

和试药

名称

厂家

批号

有效期

标准规定

不得高于           

检验方法

照氰化物检查法检测（第一法、第二法、第三法）（中国药典2020年版四部通则0806）

实验操作

一、第一法

仪器装备照砷盐检查法（通则0822) 项下第一法的仪器装置；但在使用时，导气管C 中不装醋酸铅棉花，并将旋塞D 的顶端平面上的溴化汞试纸改用碱性硫酸亚铁试纸(临用前，取滤纸片，加硫酸亚铁试液与氢氧化钠试液各1滴，使湿透，即得)

样品检测：

除另有规定外，取各品种项下规定量的供试品         ，置A瓶中，加水10ml与10%酒石酸溶液3ml，迅速将照上法装妥的导气管C 密塞于A 瓶上，摇匀，小火加热，微沸1分钟。取下碱性硫酸亚铁试纸，加三氯化铁试液与盐酸各1滴，15分钟内不得显绿色或蓝色。

二、第二法   光散射法

仪器装置如图：A 为200ml具塞锥形瓶；B 为5ml的烧杯，其口径大小应能置于A 瓶中。

标准氰化钾溶液的制备：

取氰化钾25mg，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。临用前，精密量取5ml，置250ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇勻，即得(每l ml相当于  2  μg的CN)，本液须临用前配制。

样品检测：

除另有规定外，取各品种项下规定量的供试品        ，置A 瓶中，加水至5ml，摇匀，立即将精密加有三硝基苯酚锂试液1ml的B 杯置入A 瓶中，密塞，在暗处放置过夜；取出B 杯，精密加水2ml于B 杯中，混匀，照紫外-可见分光光度法（通则0401)，在  500nm的波长处测定吸光度              ，与该品种项下规定的标准氰化钾溶液加水至5ml按同法操作所得的吸光度                     相比较，不得更大。

三、第三法

检测原理：

在酸性条件下，溴化氰与吡啶联苯胺发生显色反应，采用紫外-可见分光光度法测定Hib多糖衍生物中溴化氰的含量。

试剂配制：

(1) 60%的吡啶溶液：量取吡啶30ml，加水20ml，摇匀，即得。

(2) 2%盐酸溶液：量取盐酸0.5ml，加水9.5ml，摇匀，即得。

(3) 吡啶联苯胺溶液：取联苯胺0.5g，精密称定，加60%吡啶溶液50ml使溶解，再加人2%盐酸溶液10ml，摇匀，即得。临用前配制。

对照溶液的制备：

(1) 0. 1 mg /ml溴化氰对照贮备液：取溴化氰10mg，精密称定，加乙腈适量使溶解，加水稀释至100ml，摇匀，即得。临用前配制。

(2 )溴化氰对照工作液(500ng/ml) ：精密量取溴化氰对照贮备液1ml，加水稀释至200ml，摇匀，即得。

供试品溶液的制备:

取多糖衍生物          ，配制成10 mg/ml的溶液，即得。

样品检测:

量取吡啶联苯胺溶液2.0ml，加水2.0ml，混匀，20℃以下、暗处放置15分钟后，在波长520nm处测定吸光度，作为空白对照。

量取供试品溶液2.0ml，加吡啶联苯胺溶液2.0ml，混匀，20℃以下、暗处放置15分钟后，在波长520nm处测定吸光度。

分别量取溴化氰对照工作液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml于试管中，每管依次加水1.9ml、1.8ml、1.6ml、1.4ml、1.2ml、1.0ml，加人吡啶联苯胺2.0ml，混匀，20℃以下、暗处放置15分钟后，在波长520nm处测定吸光度。

结果计算：

以对照工作液中溴化氰的含量(ng/ml) 对其相应的吸光度作线性回归，求得线性回归方程，将供试品溶液的吸光度代入线性回归方程，求得供试品溶液中溴化氰的含量 B (ng/ml) 。

供试品中溴化氰的含量（ng/mg）=B/20

式中：B为供试品溶液中溴化氰的含量，ng/mg；

      20为供试品溶液中多糖衍生物的含量（mg/ml)。

检测结果及分析

氰化物是否超过限度要求        。

实验结论

□符合规定　　□不符合规定