Nanoprobes原位杂交：基因检测的演变（从 Nanogold到EnzMet）

如何在 DNA（和 RNA）组合在一起后通过原位杂交来检测它？接下来一起看看原位杂交：基因检测的演变，从 Nanogold® 到 EnzMet™。

艾美捷 Nanoprobes 关于Nanogold®原位杂交的文章最近非常火，紧接着，一种强大的原位杂交新技术：EnzMet ™诞生了。

Nanoprobes的原位杂交技术都有自己的应用范围；在这里收集了一些资源来帮助用户选择适合的研究领域的方法。

Human Pathology的专题文章讨论了多种原位杂交检测方法的发展、特点和比较优点，包括：

1.Nanogold® 银增强

2.Nanogold® 与金增强 (GOLDFISH)

3.EnzMet ™（原名 酶金相）

这些原位杂交方法在开发用于HER2基因扩增的显色测定的背景下进行了讨论；这是乳腺癌中恶性肿瘤行为的重要指标，也是用于评估患者接受人源化单克隆抗体治疗（赫赛汀/曲妥珠单抗）的标准之一。

Nanoprobes 金相原位杂交的演变：

(a)和(b)：通过酪胺信号放大(TSA，也称为CARD，或催化的报道分子沉积)检测SiHa细胞中HPV-16的单拷贝，然后用(a)用DAB开发的链霉亲和素-过氧化物酶检测，和(b) streptavidin-Nanogold® 与醋酸银自动金相学。HPV-16 的副本显示为单点。（H & E 复染。原始放大倍数 X 560）。

(c) Nanogold® 与金增强 (GOLDFISH) 程序在具有 HER2 基因扩增的组织中，显示来自紧密接近的多个基因拷贝的大的、汇合的核信号。核固红复染剂（原始放大倍数 400）。

(d) : EnzMet™ 检测石蜡包埋的人类浸润性乳腺癌活检中单个 HER2 基因拷贝的扩增；正常、未扩增的细胞包含 HER2 基因的两个拷贝，而浸润性 HER2 扩增的癌细胞显示多个拷贝（原始放大倍数 X 400。图片由克利夫兰诊所基金会的 RR Tubbs 博士提供）。

文献参考：

1.Powell, R. D.; Pettay, J. D.; Powell, W. C.; Roche, P. C.; Grogan, T. M.; Hainfeld, J. F., and Tubbs, R. R.: Metallographic in situ hybridization. Hum. Pathol., 38, 1145-1159 (2007).

Abstract and full article available on the Human Pathology website

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2.Tubbs, R. R.; Pettay, J.; Skacel, M.; Downs-Kelly, E.; Powell, R. D.; Hicks, D. G., and Hainfeld, J. F.: Gold and Silver-Facilitated Metallographic In Situ Hybridization Procedures for Detection of HER2 Gene Amplification. In: Molecular Morphology in Human Tissues; Hacker G.W., and Tubbs, R. R. (Eds): CRC Press, Boca Raton, FL. Ch. 5, pp. 101-106 (2005).

Full text available from CRCNetBase (Shibboleth, Athens)

3.Tubbs, R.; Pettay, J.; Hicks, D.; Skacel, M.; Powell, R.; Grogan, T., and Hainfeld, J.: Novel bright field molecular morphology methods for detection of HER2 gene amplification. J. Mol. Histol., 35, 589-594 (2004).

Abstract and full text available from SpringerLink.