Nanoprobes免疫测定丨FluoroNanogold试剂免疫染色方案

艾美捷 Nanoprobes 双标记免疫细胞化学和免疫组织化学试剂：FluoroNanogold——独特的 Fab 片段探针包含 1.4 nm Nanogold® 颗粒和荧光素荧光团，可在单个标记过程中同时对完全相同的结构进行荧光和电子显微镜观察。该探针比整个 IgG 分子小，不会聚集，并且由于金颗粒而导致的荧光猝灭可以忽略不计。

 

 

 Nanoprobes  FluoroNanogold：是一种独特的两用探针。FluoroNanogold TM试剂由用荧光素和 1.4 nm Nanogold 颗粒标记的亲和纯化的 Fab' 片段（来自山羊抗小鼠 IgG、山羊抗兔 IgG 和其他多克隆 IgG 抗体）组成。在荧光显微镜下，这些探针可以像传统的荧光标记抗体一样使用，2而在电子显微镜下，它们的可视化方式与 Nanogold ®试剂完全相同. 3荧光和电子显微镜的结合，或称为相关显微镜，允许在两个显微镜中对相同的较精确结构进行成像。共价标记连接是无限期稳定的，在铰链硫醇位点的连接确保最大程度地保留天然免疫反应性。这些试剂以 0.08 mg/mL 的 Fab' 浓度提供，溶解在 20 mM 磷酸盐缓冲盐水 (150 mM NaCl) 中，pH 7.4，含 0.1% BSA 和 0.05% 叠丨氮化钠作为防腐剂。每种偶联物的标记程度通常是一个 Nanogold ®粒子和每个 Fab 分子 2-3 个荧光团，准确的标记程度在产品规格表上注明。FluoroNanogold TM偶联物应储存在 2-8°C。不要冻结。避光。

使用艾美捷 Nanoprobes FluoroNanogold试剂进行免疫染色的一般注意事项：

基本上，标签的每个组成部分的常规方法都可以成功地与 FluoroNanogold TM标记试剂一起使用。由于金颗粒对荧光的某些猝灭，建议在孵育时使用稍高浓度的抗体。已发现 5% 脱脂奶粉的封闭剂在某些情况下可减少非特异性背景染色：这应在与探针孵育之前使用（在标准清洗/封闭步骤中），此外，FluoroNanogold TM探针可以稀释在使用时还含有 1% 脱脂奶粉的溶液中。

艾美捷 Nanoprobes FluoroNanogold特性：

1.FluoroNanogold TM含有J其均匀的 1.4 nm 直径金颗粒 (±10%)。

2.荧光素的吸收最大值出现在 494 nm 附近，发射最大值在 518 nm 附近。

3.FluoroNanogold TM -Fab' 小于单个完整的 IgG 分子。它并不比 Fab'-Nanogold ® 大很多，Fab'-Nanogold ®是市售的最小的金免疫探针，并且可以穿透并到达其他金探针无法接触到的抗原。

4.FluoroNanogold TM -Fab 通过凝胶过滤柱进行色谱纯化。没有聚集体或其他分子量杂质。这与胶体金偶联物形成鲜明对比，胶体金偶联物通常通过离心制备以去除最大的聚集体，并且通常包含较小的聚集体。

5.接近 1 Nanogold ®到 1 Fab' 使该产品与胶体金 - 抗体制剂的 0.2 - 10 可变化学计量不同。

6.FluoroNanogold TM颗粒不像胶体金那样对蛋白质具有亲和力。这减少了背景和错误标记。

7.FluoroNanogold TM 与大多数胶体金相比，银和金的显影效果更好，因此具有更高的灵敏度。银和金增强均可用于使免疫标记可用于电子显微镜、光学显微镜和免疫印迹，并改善结果。