Worthington细胞色素 C 消化研究丨羧肽酶 B方案

羧肽酶 B背景：

羧肽酶 B (CPDB) 是一种金属羧肽酶，它催化碱性氨基酸、赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸从多肽的 C 端位置水解：

肽基-L-赖氨酸(-L-碱性氨基酸) + H 2 O --> 肽 + L-赖氨酸(L-碱性氨基酸)

羧肽酶作为酶原由胰腺的腺泡细胞分泌。酶原被小肠中的胰蛋白酶激活。

 

Worthington 羧肽酶 B特异性：

CPDB 由胰蛋白酶激活。CPDB 对赖氨酸和精氨酸具有高度特异性，但对精氨酸表现出偏好（Tan 和 Eaton 1995）。它还可以（以较慢的速度）作用于缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、天冬酰胺、甘氨酸和谷氨酰胺（Villegas等人1995，Nishihira等人1995）。与 CPDA 中的 Gly207、Ile243 和 Ile255 相比，羧肽酶 A (CPDA) 和 CPDB 之间的特异性差异可归因于 CPDB 中的 Ser205、Gly241 和 Asp253 残基（Coll等， 1991）。

艾美捷Worthington羧肽酶 B作品：

CPDB 的主要形式是单体状态。CPDB 每摩尔蛋白质含有 1 个锌原子。与锌残基配位的残基是保守的，包括两个组氨酸、一个谷氨酸和一个水 (Avilés and Vendrell 2004)。

Worthington羧肽酶 B的4个应用：

1.通过连续切割 C 端碱性氨基酸进行序列分析

2.急性胰腺炎诊断的血清标志物（Avilés 和 Vendrell 2004）

3.细胞色素 C 逐步消化 (Südi et al. 1989)

4.人胰岛素生产（Ladisch 和 Kohlmann 1992）

相关文献：

1.Akanuma, H.、Kasuga, A.、Akanuma, T. 和 Yamasaki, M.： 亲和色谱在研究牛羧肽酶 B 与碱性和芳香酸类似物的复合物形成中的有效应用 ， Biochem Biophys Res Commun 45， 1971 年 2 月 27 日

2.Avrameas, S. 和 Uriel, J.：猪胰水解酶的系统分离。二、在 0.40 饱和度下不溶于硫酸铵溶液的酶的分馏， 生物化学 4 , 1750, 1965

3.Brunori, M.、Antonini, E.、Wyman, J.、Zito, R.、Taylor, J. 和 Rossi-Fanelli, A.： 血红素蛋白的氧化还原电位研究。二、人血红蛋白的羧肽酶消化 ， J Biol Chem 239 , 2340, 1964