壳聚糖载抗生素水凝胶/接枝Nogo-A抗体的温敏型壳聚糖水凝胶/巯基化壳聚糖水凝胶的制备

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接枝Nogo-A受体(NgR)抗体的温敏型壳聚糖(C/GP)水凝胶制备方法：β-甘油磷酸钠(GP)与壳聚糖(C)按1∶3体积比制备C/GP水凝胶,氧化接枝NgR抗体,制备C/GP-NgR抗体水凝胶,观察理化性状及成胶,检测NgR抗体水平.分离、培养BMSCs,流式细胞仪检测CD34、CD45、CD29、CD90的表达;第3代BMSCs分别接种于C/GP水凝胶(A组)及C/GP-NgR抗体水凝胶(B组)上培养,水溶性四氮唑(WST-1)法检测BMSCs细胞增殖效应,吖啶橙(AO)染色及荧光倒置相差显微镜观察BMSCs生长及活性.

巯基化壳聚糖(CS-NAC)的制备：以壳聚糖(CS),N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)为原料,合成了巯基化壳聚糖(CS-NAC),并于CS-NAC的磷酸盐缓冲溶液(PBS)中通过氧化交联巯基形成二硫键制备了CS-NAC水凝胶.Ellman法测定结果表明:该水凝胶巯基质量摩尔浓度为275.8μmol/g.采用~1HNMR和FTIR表征了CS-NAC的结构并采用SEM及UV-vis对CSNAC进行了性能测试.结果表明:当w(CS-NAC)=1.5%~3.0%时可以形成稳定的凝胶结构,当CS-NAC质量分数从1.5%增加至3.0%时,水凝胶溶胀比从45.5降低至31.2,网孔尺寸从340 nm减小至242 nm.

该二硫键交联的水凝胶可发生还原响应的降解,CS-NAC水凝胶在含10 mmol/L二硫苏糖醇(DTT)的PBS溶液中400 min内质量降解80%,在含50 mmol/L L-半胱氨酸(L-Cys)的PBS溶液中180 min可被完全降解.原位装载牛血清蛋白(BSA)的CS-NAC水凝胶可实现对BSA还原响应的控制释放,在含10 mmol/L DTT的PBS溶液中BSA累积释放量可高达80%,表现出典型的Fickian扩散控制释放行为.瑞禧小编就分享到这里了。

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