艾美捷双链RNA定量试剂盒作用盒原理分析

在mRNA疫苗生产过程中，需要通过T7 RNA聚合酶体外转录（IVT, In Vitro Transcription）制备mRNA，在这一过程中会产生双链RNA（dsRNA, double-stranded RNA）等副产物，dsRNA除了会触发机体的天然免疫反应，还可能导致mRNA发生降解。所以dsRNA的残留量是mRNA药物的关键质量属性，IVT制备mRNA时，需对残留的dsRNA进行检测和去除，以获得免疫原性较低的功能性mRNA，同时提高mRNA表达水平。   

因此，双链RNA (dsRNA) 抗体及ELISA试剂盒常被应用于mRNA产品的质控环节。dsRNA抗体包括J2单克隆抗体(Anti-dsRNA mAb J2)，J5单克隆抗体(Anti-dsRNA mAb J5)，K1单克隆抗体(Anti-dsRNA mAb K1)和K2单克隆抗体(Anti-dsRNA mAb K2)，其中J2抗体是dsRNA检测的金标准。J2抗dsRNA IgG2a单克隆抗体已成为dsRNA检测的金标准。它最初用于植物病毒的研究，但自从Weber等人在2006年的开创性论文发表以来，J2被用来证明所有正链RNA病毒在感染的细胞中产生的大量dsRNA，这种抗体已广泛用于各种系统，有超过200多篇引用文献。J2可用于检测多种病毒的dsRNA中间体，如丙型肝炎病毒、登革热病毒、鼻病毒、基孔肯雅病毒、狂犬病病毒、脊髓灰质炎病毒、猪瘟病毒、雀麦花叶病毒以及更多存在于培养细胞和固定石蜡包埋的组织学样品中的病毒dsRNA。

艾美捷双链RNA定量试剂盒，利用双抗夹心ELISA原理，检测核酸提取物中的病毒dsRNA或非病毒来源的天然或合成的dsRNA，以及检测人工合成(m)RNA制剂中的dsRNA杂质。  

艾美捷双链RNA定量试剂盒原理：

基于使用两种双链 RNA (dsRNA) 特异性单克隆抗体，dsRNA 检测试剂盒可以灵敏和选择性地检测 dsRNA 分子（大于 30-40 bp），而不受其核苷酸组成和序列的影响。检测具有高度特异性：在存在 1.000-10.000 倍过量其他核酸的情况下，可以检测核酸提取物中的dsRNA。该测定基于双抗夹心ELISA原理，使用 J2 (IgG2a) 小鼠单克隆抗体作为捕获抗体，单克隆抗体 K2 (IgM) 用作检测抗体。

艾美捷双链RNA定量试剂盒相关研究：

MBS574013   Mouse anti double-stranded RNA (J2)   0.2mg

MBS574015   Mouse anti double-stranded RNA (K1)   0.2mg

MBS574017   Mouse anti double-stranded RNA (K2)   5ml

MBS574019   Mouse anti double-stranded RNA (J5)   0.2mg

MBS574021   Mouse anti double-stranded RNA (J2, J5 and K1) Comparison Kit   3x0.1mg