Worthington公司氨基酸氧化酶，L-的特异性分析

Worthington公司氨基酸氧化酶，L-历史：

LAAO 是由 Zeller 和 Maritz 首次发现的（Zeller 和 Maritz 1944, 1945）。它被发现存在于几乎所有的蛇毒中，并于 1948 年被指定为黄素蛋白（Zeller 1948）。

LAAO 于 1958 年由 Wellner 和 Meister 首次以晶体形式制备。1960 年，Wellner 和 Meister 研究了酶的特性，包括辅基、电泳组分、稳定性和 pH 依赖性。在这项研究中，他们还分离了Agkistrodon piscivorus piscivorus的 LAAO，并将其与C. adamanteus的 LAAO 进行比较。不久之后，研究了酶机制并阐明了机制的更多细节（Wellner 和 Meister 1961，以及 Massey 和 Curti 1967）。还研究了氧化酶反应的动力学（Radd 1964 和 Zeller等人1965）。

在 1970 年代，乙烯基甘氨酸被确定为 LAAO 的自杀底物/灭活剂（Marcotte 和 Walsh 1976），还研究了 pH 值和竞争性抑制剂的影响（de Kok 和 Veeger 1968）。C. adamanteus的LAAO是个被发现可作为杀菌剂的 LAAO，这一特性至今仍在研究中（Skarnes 1970 和 Zuliani等人2009）。基因序列由 Raibekas 和 Massey 于 1998 年确定。

最近的工作涉及使用 LAAO 来研究细胞凋亡和细胞毒性作用（Stábeli等人2007），并且 LAAO 也正在研究其作为抗寄生虫剂的用途（Sant'Ana等人2008）。

Worthington公司 L-氨基酸氧化酶 (LAAO) 催化许多 L-氨基酸的氧化脱氨，主要是疏水性和芳香族 L-氨基酸。LAAO 约占某些蛇类总毒液的 30%（Takatsuka et al. 2001）。

Worthington氨基酸氧化酶，L-特异性：

LAAO 对 L-异构体具有特异性。底物是亮氨酸、异亮氨酸、正亮氨酸、α-氨基丁酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸正缬氨酸、蛋氨酸、组氨酸和瓜氨酸的 L-异构体。不能在 L,D 混合物中测定组氨酸和酪氨酸（Malmstadt 和 Hadjiioannov 1963）。亚甲蓝可用作电子受体。L-丝氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、戊二酸、赖氨酸和鸟氨酸仅在有限程度上脱氨基。

LAAO 被认为包含三个疏水性底物结合位点，指定为a、b和c。子位点a容纳一个亚甲基碳，b两个，c三个。氨基结合亚位点指定为d (Tan et al. 1991)。该模型用于解释为什么在第二个碳上具有分支的氨基酸无法容纳到亚位点a中，并且被缓慢氧化或根本不被氧化（Zuliani等人， 2009 年）。

 

Worthington氨基酸氧化酶，L-分子特征：

LAAOs 分布广泛，存在于细菌、真菌、绿藻、植物和蛇毒中。蛇毒的 LAAO 显示出高度的序列同源性，在 24 个 N 端氨基酸中至少有 13 个被认为与底物结合有关。（Zuliani等人， 2009 年）。N-末端序列包含一个高度保守的 β-α-β-折叠结构域，参与 FAD 结合 (Du et al. 2002)。

 

 

Worthington氨基酸氧化酶，L-的应用：

某些氨基酸的纯化和测定（Nicholson 和 Kim 1975）

α-酮酸的制备 (Nicholson and Kim 1975)

测定肽酶活性（Nicholson 和 Kim 1975，以及 Donlon 和 Fottrell 1971）

氧化反应

超临界 CO 2中的催化剂（Findrik等人， 2005 年）