1.制作sgRna,他是用来确定你要删除的基因段的位置,是哪一段。这个可以自己用软件设计好了碱基顺序,让生物公司帮你合成大概几千块。最好还是想办法自己合
2.制作cas9蛋白,这个蛋白可以把他的基因导入细胞里,让细胞细胞生产,这个蛋白的作用就是真正的删除。
3.准备细胞、比如我的头皮细胞、脚皮细胞等...
4.用基因枪(买一个就10万)把cas9蛋白或者sgRna导入细胞内
5.这样细胞就编辑好了,可以观察或者培养他的后代了。比如测序啊,看看他的性状呀,有没有什么变化之类的。主要是观察。
注意:这个方法只是把他切除,然后细胞会自动修复,修复的时候会变异。所以说还是比较难控制的。
细胞更倾向于使用非同源末端连接(NHEJ)等更快速但不太准确的修复机制