Kamiya丨Kamiya艾美捷人β2-微球蛋白ELISA说明书

Kamiya艾美捷人β2-微球蛋白ELISA预期用途：

人β2-微球蛋白ELISA是一种高度敏感的双位点酶联免疫测定（ELISA）人类生物样品中β2-微球蛋白的定量测定。仅供研究使用。

β2-微球蛋白（B2M）是一种11 kDA蛋白。它形成MHC I类分子的亚基，并与包括淋巴细胞在内的许多细胞的外膜。它在正常人的血清和尿液中含量很低，但在患有肾脏疾病、肾脏移植和各种其他炎症和传染性疾病的人群中浓度较高条件。

Kamiya艾美捷人β2-微球蛋白ELISA原理：

在本试验中，β2-微球蛋白存在于样品中的抗β2-微球蛋白抗体与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔。通过洗涤去除未结合的蛋白质后加入辣根过氧化物酶（HRP）。这些酶标记的抗体与先前结合的B2M之间。在另一个洗涤步骤之后，通过添加显色底物3，3’，5，5’-TMB来测定与免疫吸附结合的酶。结合酶的数量与测试样品中B2M的浓度；因此，在450nm处的吸光度是B2M在测试样品。测试样品中B2M的量可根据以下公式构建的校准曲线进行插值：并对样品稀释进行校正。

Kamiya艾美捷人β2-微球蛋白ELISA试剂制备：

1.浓缩稀释剂

提供的稀释剂溶液为5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1:5。

2.浓缩洗涤液

提供的洗涤液为20X浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1:20。结晶当储存温度较低时，精矿中的形成并不罕见。将精矿加热至稀释前30-35°C可溶解晶体。

3.酶抗体结合物浓缩物

通过添加10µL计算每个微量滴定板测试条所需的工作标记溶液量酶抗体缀合物与990µL 1X稀释剂，用于每个测试条。混合均匀，但轻轻地避免起泡。使用前立即稀释并避光。

4.TMB基板溶液

随附随用。

5.停止解决方案

随附随用。

6.微量滴定板

随附随用。打开微量滴定袋并从袋中取出板。移除所有将不得用于分析，将其放回袋中，并与干燥剂一起重新密封。

7.人β2-微球蛋白校准器

将1.0mL蒸馏水或去离子水加入冻干人B2M校准器中，轻轻混合直至溶解。校准品现在的浓度为715.0 ng/mL（重组校准品应等分如果打算将来使用，则冻结）。在每一步之间充分混合。避免起泡。