Kamiya丨Kamiya艾美捷小鼠血清淀粉样蛋白A ELISA说明书

Kamiya艾美捷小鼠血清淀粉样蛋白A ELISA预期用途：

小鼠血清淀粉样蛋白A ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫分析（ELISA）小鼠生物样品中血清淀粉样蛋白A（SAA）的定量测定。仅供研究使用。

引言

铜蓝蛋白是参与铜转运的多功能蛋白，也是重要的血清抗氧化剂。在此期间炎症，创伤性损伤或心肌梗塞，血清铜蓝蛋白水平，作为急性期反应物，上升2-3倍。

Kamiya艾美捷小鼠血清淀粉样蛋白A ELISA原理：

在该测定中，样品中存在SAA与已经吸附到聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗SAA抗体反应。之后通过洗涤除去未结合的蛋白质，加入与辣根过氧化物酶（HRP）缀合的抗SAA抗体。该HRP缀合的抗体与先前结合的SAA形成复合物。在另一个洗涤步骤之后通过添加显色底物3,3'，5,5'来测定与免疫吸附剂结合的酶-四甲基联苯胺（TMB）。结合酶的数量与样品中SAA的浓度成正比测试；因此，450nm处的吸光度是测试样品中SAA浓度的量度。数量测试样品中的SAA可以从校准器构建的校准曲线内插，并进行校正样品稀释。

Kamiya艾美捷小鼠血清淀粉样蛋白A ELISA组件：

1.稀释剂浓缩物

一瓶含有50毫升5X浓缩稀释剂运行缓冲液。

2.洗涤液浓缩物

一瓶装有50毫升20X浓缩洗涤液。

3.酶-抗体缀合物浓缩物

一小瓶含有150μL与HRP缀合的100X浓缩亲和纯化的抗小鼠SAA抗体

稳定缓冲器。

4.TMB底物溶液

图1。

KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY

3 Rev.15092346

一瓶含有12mL TMB和过氧化氢的柠檬酸缓冲液，pH3.3。

5.停止解决方案

一瓶含有12毫升0.3M硫酸。

警告：避免接触皮肤。

6.微量滴定板

在孔保持器框架中有12个可拆卸的8孔条。用亲和纯化的抗小鼠SAA包被孔。

7.鼠标SAA校准器

一个小瓶含有冻干的小鼠SAA校准品。

试剂制备

1.稀释剂浓缩物

提供的稀释剂溶液是5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水1:5稀释。

2.洗涤液浓缩物

提供的洗涤溶液是20倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水按1:20稀释。水晶当储存温度低时，浓缩物中的形成并不少见。将浓缩物升温至稀释前30-35°C可溶解晶体。

3.酶-抗体缀合物浓缩物

通过添加10μL计算每个微量滴定板测试条所需的工作共轭溶液量对于用于测试的每个测试条，酶-抗体与990μL1X稀释剂缀合。均匀，但轻轻混合。避免起泡。使用前立即稀释并避光。

4.TMB底物溶液

随时可用。

5.停止解决方案

随时可用。

6.微量滴定板

KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY 4 Rev.15092346随时可用。密封微量滴定袋并从袋中取出板。去除所有会不用于测定并放回袋中并与干燥剂一起重新密封。

7.鼠标SAA校准器

向冻干的小鼠SAA校准品中加入1.0 mL蒸馏水或去离子水，轻轻混合直至溶解。这个校准器现在的浓度为13.80μg/mL（如果将将来，重组校准器应等分并冷冻目的是使用）。根据下表在使用前立即准备鼠标SAA校准器。混合好在每个步骤之间。避免起泡。