艾美捷Immunochemistry FAM FLICA Poly Caspase检测方案

Caspases在细胞凋亡和炎症中发挥重要作用。ICT的FLICA检测试剂盒被研究人员用于通过培养的细胞和组织中的胱天蛋白酶活性来定量凋亡。FAM FLICA Poly Caspase探针允许研究人员评估胱天蛋白酶的激活。

用艾美捷Immunochemistry FAM-FLICA Poly caspase检测试剂盒检测活性半胱天冬酶。该体外试验使用荧光抑制剂探针FAM-VAD-FMK标记活细胞中的活性半胱天冬酶。使用荧光显微镜、荧光平板读取器或流式细胞仪分析样品。

艾美捷Immunochemistry FAM FLICA Poly Caspase检测试剂盒化学性质：

试剂名称FAM-VAD-FMK

靶向多聚胱天冬酶

激发/发射492 nm/520 nm

分析方法流式细胞仪、荧光板读取器、荧光显微镜

样品类型细胞培养

储存2-8°C

协议：

准备样品和对照品

用diH20稀释10X凋亡洗涤缓冲液1:10。

用50µL DMSO重新配制FLICA。

加入200µL PBS稀释FLICA 1:5。

在1:30时将稀释的FLICA添加到每个样品中（例如，添加10µL至290µL培养细胞）。

培养约1小时。

取出培养基并洗涤细胞3次：加入1X凋亡洗涤缓冲液并旋转细胞。

如果需要，用其他污渍标记，如Hoechst、碘化丙啶、7-AAD或抗体。

如果需要，修复单元格。

使用荧光显微镜、荧光板读取器或流式细胞仪进行分析。FAM-FLICA在492nm激发，在520nm发射。

如果使用贴壁细胞，请参阅手册了解其他方案。

Immunochemistry FAM-FLICA Poly caspase检测试剂盒组分：

Kit 91: 25 Tests

FLICA Poly Caspase Reagent (FAM-VAD-FMK), 1 vial, #637

10X Apoptosis Wash Buffer, 15 mL, #635

Fixative, 6 mL, #636

Propidium Iodide, 1 mL, #638

Hoechst 33342, 1 mL, #639

Kit Manual

Kit 92: 100 Tests

FLICA Poly Caspase Reagent (FAM-VAD-FMK), 4 vials, #637

10X Apoptosis Wash Buffer, 60 mL, #634

Fixative, 6 mL, #636

Propidium Iodide, 1 mL, #638

Hoechst 33342, 1 mL, #639

Kit Manual

参考文献：

Gioulbasani M, Galaras A, Grammenoudi S, Moulos P, Dent AL, Sigvardsson M, Hatzis P, Kee BL, Verykokakis M. The transcription factor BCL-6 controls early development of innate-like T cells. Nat Immunol. 2020 Sep;21(9):1058-1069. doi: 10.1038/s41590-020-0737-y. Epub 2020 Jul 27. Abstract

Dodard G, Tata A, Erick TK, Jaime D, Miah SMS, Quatrini L, Escalière B, Ugolini S, Vivier E, Brossay L. Inflammation-Induced Lactate Leads to Rapid Loss of Hepatic Tissue-Resident NK Cells. Cell Rep. 2020 Jul 7;32(1):107855. doi: 10.1016/j.celrep.2020.107855. Full Text

Wandel MP, Kim BH, Park ES, Boyle KB, Nayak K, Lagrange B, Herod A, Henry T, Zilbauer M, Rohde J, MacMicking JD, Randow F. Guanylate-binding proteins convert cytosolic bacteria into caspase-4 signaling platforms. Nat Immunol. 2020 Aug;21(8):880-891. doi: 10.1038/s41590-020-0697-2. Epub 2020 Jun 15. Abstract