抗原回收试剂,pH 6(10X)用于回收通过在交联固定剂如福尔马林中固定而被掩盖的抗原。
艾美捷Enzo抗原回收试剂,pH 6化学性质:
配方:液体。在柠檬酸缓冲液中。
应用:IHC
运输:蓝冰运输
长期储存:+4°C
技术信息说明:为了进行免疫染色,组织标本应保存在适当的固定剂中。固定可以阻止组织自溶,保护组织结构,并固定抗原。然而,抗原在固定过程中会发生一级、二级和三级结构的化学变化。由于表位或邻近蛋白中诱导的变化,抗原位点可能被掩盖。已经用蛋白水解酶(即胃蛋白酶、胰蛋白酶或蛋白酶)进行酶处理以暴露被掩蔽的抗原。
Shi等人(1991)报道,在微波炉中用重金属溶液处理组织切片可以显著覆盖被掩蔽的抗原。然而,溶液中的重金属会增加实验室人员接触有毒物质的风险。为了降低风险,Enzo开发了一种不含重金属的抗原脱皮溶液。试剂以方便的10X浓缩液提供。使用这种抗原回收缓冲液可避免实验室人员接触不必要的重金属以及其他处理和处置问题。用户应全权负责解释结果。
艾美捷Enzo抗原回收试剂,pH 6(10X)建议方案:
1.组织切片去石蜡化和再水化。
2.通过将10 mL pH为6(10X)的抗原回收试剂与90 mL去离子水混合制成100 mL溶液,制备1倍抗原回收溶液。
3.用足够的抗原回收溶液(参见步骤2)填充铜箔罐,以覆盖载玻片上的组织切片。
将蒸锅或水浴预热至95-100°C。
4.将铜罐放在蒸锅或水浴中。
5.将脱蜡载玻片(1-3片/瓶)放入铜箔瓶中并孵育20-40分钟(最佳孵育时间和温度应由最终用户确定,可能因不同的抗体和组织类型而异)。
6.从水浴中取出铜罐,让载玻片冷却20分钟至室温。
7.在去离子水中清洗载玻片,然后用清洗缓冲液清洗。进行免疫染色。
RUO-仅供研究使用
艾美捷Enzo抗原回收试剂,pH 6文献参考:
Comprehensive Characterization of Immunological Profiles and Clinical Significance in Hepatocellular Carcinoma: P. Tao, et al.; Front. Oncol. 10, 574778 (2021), Abstract; Full Text
Timeline of Changes in Biomarkers Associated with Spinal Cord Injury-Induced Polyuria: J.H. Gumbel, et al.; Neurotrauma Rep. 2, 462 (2021), Abstract;