Worthington丨Worthington 蛋白酶K（Proteinase K）说明书

艾美捷Worthington天然蛋白酶K，代码PROK和PROKS已停用，并被重组蛋白酶K，产物代码PROKR和PROKRS取代。

蛋白酶K是一种丝氨酸蛋白酶，对脂肪族、芳香族和其他疏水性氨基酸具有广泛的特异性。PROK的分子量为27000道尔顿，并且依赖于Ca2+。它不被金属离子螯合剂如EDTA、巯基试剂、PCMB、TLCK或TPCK灭活。它在0.5%SDS中也保持活性。它可以被PMSF或DFP抑制。

稳定性/储存：冻干粉末在2-8°C下稳定一年。50mM Tris-HCl，pH 8.0和1mM CaCl2的溶液在2-8°C下稳定数月。储存于2-8°C。

艾美捷Worthington蛋白酶K相关研究：

白蛋白，无核酸酶（BSANF）

脱氧核糖核酸酶I（DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF）

组蛋白（H，NHL）

溶菌酶（LY/LYSF）

核酸酶，微球菌（NFCP）

核酸酶，S1（SINUC/SINUCL）

核酸、DNA、大肠杆菌、Lambda/片段、RNA

碱性磷酸酶（CAP/BAPF/BAPC/BAPSF/PC）

磷酸二酯酶I（VPH）

磷酸二酯酶II（SPH）

逆转录酶，重组HIV（RTHIV）

核糖核酸酶A（R/RAF/RASE/RS/RPDF）

无动物源核糖核酸酶T1（RT1S）

单位定义：

在37°C，pH 7.5，使用尿素变性血红蛋白作为底物，One Unit释放1微摩尔Folin阳性氨基酸（以酪氨酸计）。

蛋白酶K（PROK）是一种具有广泛作用的丝氨酸内肽酶，从真菌Tritirachium album liber的滤液中分离出来。

艾美捷Worthington Tritirachium album liber蛋白酶K的特征：

特异性

除了肽键的裂解，它还能够催化肽酰胺水解。蛋白酶K被氟磷酸二异丙酯（DFP）或苯基甲烷磺酰氟（PMSF）灭活。螯合剂如柠檬酸盐和EDTA对酶活性没有影响。

应用

蛋白酶K在分离高度天然、未受损的DNA或RNA中非常有用，因为大多数微生物或哺乳动物的DNA和RNA都被酶快速灭活，特别是在0.5-1%SDS存在下。

蛋白酶K的特性

分子量

28900道尔顿。

J佳pH值

7.5-12，以变性血红蛋白为底物。

存储

PROK/PROKR：储存温度为2-8°C；PROKS/PROKRS：储存温度-20°C

沃辛顿PROK/PROKR是一种高纯度冻干粉末。代码PROKS/PROKRS是含有50%甘油的20mg/ml溶液。两者均经测试不含DNase和RNase。

稳定性

尽管钙离子不影响酶的活性，但当浓度为1-5μmol时，它们确实有助于酶的稳定性。蛋白酶K的一个有趣的特征是，它在十二烷基硫酸钠（SDS）或尿素存在下保持活性。（0.5-1%SDS和1-4M尿素）。将反应温度从37℃提高到50℃-60℃可以将活性提高几倍。蛋白酶K的一个特殊特征是其消化天然蛋白质的能力，从而使酶如DNase和RNase失活，而无需借助变性过程。